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商品編號:72135
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BSFM0001間充質干細胞無血清培養基

價    格:詢價

產    地:江蘇更新時間:2019/7/15 13:41:34

品    牌:佰通生物型    號:BSFM0001

狀    態:正常點擊量:297

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山東博科干細胞應用研究院有限公司

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AdvCell???間充質干細胞無血清培養基?

AdvCell?間充質干細胞無血清培養基(BSFMOO01)根據干細胞的生長需要,培養基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質、血清替代物以及其他補給成分。非常適用于培養哺乳類干細胞,包括臍帶干細胞骨髓干細胞脂肪干細胞?間充質干細胞。產品嚴格無菌,無病毒和支原體,性能穩定,使用該培養基能使干細胞在理想營養平衡狀態下進行多代擴增而不發生分化(至少10代以內)。?

★??產品號

????Cat?No?:?BSFM0001

★??產品內容

★??產品適用范圍

適用于人及哺乳類來源的間充質干細胞或成體干細胞的培養,包括臍帶間充質干細胞、骨髓間充質干細胞及脂肪干細胞。

★??使用注意事項

1.?完全培養基的制備:將以上AdvCell???間充質干細胞無血清培養基(BSFMOO01)中的AdvCell???間充?

??質干細胞基礎培養基?(BM0001)、AdvCell?干細胞培養添加劑?A(SCM0001A)以及AdvCell?干細胞?

??培養添加物?BSCM0001B)于37℃解凍并迅速混合。

2.完全培養基的存儲:配制好的完全培養基放在4℃冰箱避光保存,并盡量在一個月內使用完。

3.根據需要,培養過程中可添加一定劑量青霉素∕鏈霉素(P∕S)。

4.為達到最佳培養效果,所有細胞培養皿或培養瓶在接種細胞前用細胞墊材料(Cellpad)(BCP0001)

??被過夜或室溫包被2小時,包被后用吸管取走多余的?AdvCell??細胞墊材料(BCP0001),再接種胞。

5.如客戶用自己配制的凍存液凍存的細胞是用作臨床治療,應避免用甘油作為保護劑。

★??培養條件

?????37℃,5%CO2?,無菌恒溫培養箱培養。

★??細胞培養

【復蘇】

1.將配置好的完全培養基放入37℃水浴中預熱5-15?min;
? ? ? ? 2.從液氮中取出干細胞迅速放入37℃水浴快速解凍(解凍后不要繼續孵育細胞);
? ? ? ? 3.在超凈臺中加入5?ml的?完全培養基重懸細胞,1000?rpm離心5?min;
? ? ? ? 4.棄上清,加入?5?ml的完全培養基重懸細胞,轉移到T-25培養瓶中(帶濾芯);
? ? ? ? 5.將培養瓶置于37℃,5%CO2?的無菌恒溫培養箱中培養;

6.第二天用新鮮的?完全培養基給細胞換液。

培養】

1.在顯微鏡下觀察細胞,當細胞融合度達到80%時,即可傳代;

2.37℃水浴預熱完全培養基;

3.在超凈臺中,棄掉T-25細胞培養瓶中的培養基,加入2?ml?PBS清洗,再加入1?ml?0.25%胰酶-EDTA??

??消化細胞;

4.在顯微鏡下觀察到細胞變圓,有細胞開始脫離瓶壁時,即可加入5?ml?完全培養基終止消化;

5.用移液器輕輕吹打瓶壁上剩余的細胞,并輕輕吹打將細胞吹散;

6.將細胞轉移到15?ml離心管中,1000?rpm離心5?min;

7.棄上清,加入15-20?ml的?完全培養基重懸細胞后轉入T-75細胞培養瓶中或按適當比例傳到T-25細胞培養瓶中。確保后融合度在25-50%之間,細胞密度在1×104cells/cm2?(2.5×105?cells/T-25瓶),混合細胞懸液,確保細胞均勻分布;

8.將細胞培養瓶置于37℃,5%CO2?的無菌恒溫培養箱中培養;

9.每兩天用新鮮、預熱的完全培養基進行換液。

【凍存】

1.細胞消化和計數,用胰酶對待凍存的細胞進行消化,并對細胞進行計數。

2.1000?rpm離心5?min,去掉上清。

3.根據細胞計數的情況,加入適量的凍存液,使細胞密度在1×106/ml左右(或根據自己希望達到的細胞

??密度)。

4.輕輕地重懸細胞(務必重懸均勻),將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標記或者貼

??上標簽)中,旋緊凍存管蓋。

5.將凍存管放入程序降溫凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。

6.第二天將細胞從-80℃轉移到液氮中。






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